遺伝子クローニング

 

クローニング(クローン化)とは、

1.  単一の細胞や菌に由来する均一な細胞集団を得ること。

2.  特定のDNA配列を分離すること。方法として、種々のDNAを導入した大腸菌から、特定のDNA配列をもつ菌だけを分離することから、こう呼ばれる(?)

 

クローニングの一般的な方法

1.      プラスミドの取り扱い

2.      大腸菌へのDNA導入

3.      mRNAの調製法

4.      cDNAクローニング

5.      ゲノムDNAの調製

6.      λ系ファージの取り扱い

7.      ゲノムDNAのクローニング

 

l      制限酵素は、DNAの研究に必要不可欠

l      PCR法は、特定のDNAを増幅する方法

l      巨大なDNA配列を調べる(ショットガン法とコンティグ決定

l      塩基配列の決定法

l      塩基配列から推定されること

 

以下のファイルを見るためには、Rasmolが必要です。

C2 domain (脂質とCaの結合ドメイン)

l      synaptotagmin 

l      protein kinase C

 

PH domain(脂質結合ドメイン)

l      mSos

l      BTK

l      Dynamin

 

SH2 domain (リン酸化チロシン結合ドメイン)

l      Syp

DNA-転写因子複合体(AP1にはロイシンジッパー)

l      DNA-AP1-NFAT1 complex